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体外血脑屏障实验服务|药代动力学外包服务|药物代谢动力学实验

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在体外血脑屏障(BBB)模型的构建与评估中,Dextran(葡聚糖)作为一种常用的荧光标记物,广泛应用于检测BBB的通透性和完整性。其作用主要体现在以下几个方面:


1. 评估屏障完整性

Dextran是一种高分子多糖,具有不同分子量(如4 kDa和150 kDa)的荧光标记物(如FITC-Dextran)。在Transwell BBB模型中,Dextran常用于验证屏障的完整性。低分子量Dextran(如4 kDa)能够部分穿过BBB,而高分子量Dextran(如150 kDa)几乎无法穿过。通过检测Dextran在上下室中的浓度变化,可以评估BBB模型的紧密性和功能性。


2. 作为阴性对照

在药物或分子通透性实验中,Dextran常作为阴性对照使用。由于其分子量较大且极性较高,Dextran在完整BBB模型中的通透性较低。通过比较测试样品与Dextran的通透性,可以判断测试样品是否具有穿过BBB的潜力。


3. 检测屏障功能变化

Dextran还可用于研究BBB功能的变化。例如,在炎症或疾病状态下,BBB的紧密连接可能变得松散,导致Dextran的通透性增加。通过检测Dextran的通透性变化,可以评估BBB功能是否受损。


4. 实验操作简便

Dextran的使用方法简单,只需将其加入Transwell上室,孵育一定时间后收集下室液体,通过荧光分光光度计检测其浓度即可。实验数据可通过以下公式计算通透性:

通透性 (%) = (基底侧浓度 × 基底侧体积) / (样品侧浓度× 样品侧体积) × 100%。


5. 应用广泛

Dextran不仅适用于单层内皮细胞模型,还可用于共培养模型(如hCMEC/D3与U251细胞共培养)。通过检测Dextran的通透性,可以验证共培养模型是否更接近体内BBB的特性。

总之,Dextran在Transwell BBB模型中是一种重要的工具分子,用于评估屏障完整性、验证模型功能以及作为阴性对照。其简便的操作和广泛的应用使其成为BBB研究中不可或缺的检测手段。

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